Wkłady do hodowli komórkowych z membraną typu Anopore lub membraną z poliwęglanu firmy NUNC naśladując warunki in vivo ułatwiają przyczepianie się i wzrost komórek. Membrany typu Anapore dostarczają wyśmienitą klarowność dla obserwacji mikroskopowych i wysoką porowatość, co zwiększa poziom różnicowania się komórek.

Membrany typu Anapore dostępne są w wymiarach 10 i 25 mm średnicy, a rozmiar ich por jest w zakresie od 0.02 do 0.2 mm.

Membrany poliwęglanowe są również dostępne w wymiarach 10 i 25 mm średnicy, a rozmiar ich por wynosi 0.4, 3.0 i 8.0 mm. Membrany te są szczególnie przydatne dla badań transportu makrocząsteczek i w chemotaksji.

Dostępny w firmie Nunc 8-dołkowy, 0.2 mm wkład typu Anapore jest stosowany w płytkach 96 dołkowych. Pozwala to na miniaturyzację warunków eksperymentu i obniżenie jego kosztów poprzez redukcję użytych odczynników i czasu.

Opis produktu

Wkłady firmy Nunc dostarczane są w sterylnych opakowaniach i służą do hodowli komórkowych i tkankowych. Produkty te mogą być użyte bezpośrednio lub poddane opłaszczeniu białkiem (np. fobronektyna, kolagen itp.) Wkłady te są przeznaczone do użytku z 6-dołkowymi (wkłady -25mm) płytkami typu Nunclon Delta lub z 24-dołkowymi (wkłady 10 mm) Multidishes lub z 96 dołkowymi płytkami typu MicroWell.

• badania polaryzacji komórek nabłonkowych
• badania transportu
• modelowanie barier in vivo
• badania chemotaksji
• mikroskopia elektronowa
• eksperymenty współkultur komórkowych
• badania toksyczności

Instrukcja hodowli komórek adherentnych we wkładach.

Badania opisane poniżej powinny być wykonywane w standardowych komorach laminarnych lub w warunkach zapewniających jałowość pracy.

Przygotuj wymaganą liczbę dołków w MultiDish przez dodanie do nich odpowiedniego podłoża hodowlanego. (sugeruje się użycie 1.5-2.0 ml do 25mm wkładów i 0.5 ml do 10mm wkładów).

1. Oderwać opakowanie.
2. Uważając aby nie dotknąć membrany wyciągnąć wkład używając sterylnej pęsety.
3. Umieścić wkład we wcześniej przygotowanym dołku, membraną w kierunku dna dołka, upewniając się, że poniżej nie ma pęcherzyków powietrza.
4. Dodać zawiesinę komórek do wnętrza wkładu ( 1.5-2.0 ml do 25 mm wkładów i 0.5 ml do

10mm wkładów).

Kontynuuj standardową procedurę inkubacji i “karmienia” hodowli aby uzyskać wzrost komórek i ich odpowiednią warstwę.

Instrukcja usuwania membrany z wkładów (10mm i 25 mm).

Większość technik barwienia i mikroskopii może być wykonywana na nietkniętych wkładach. Niektóre jednak metody zmuszają do usunięcia membrany z wkładu. W tym celu prosimy o kierowanie się instrukcją zawartą w pudełku z każdym typem wkładu.

Ośmio - dołkowe wkłady hodowlane.

1. Przygotuj wymaganą liczbę dołków w płytce MicroWell przez dodanie 150-175 ml odpowiedniego podłoża hodowlanego.
1. Przed umieszczeniem wkładów pozwól na usunięcie się pęcherzykom powietrza.
1. Usuń opakowanie.
1. Uważając aby nie dotknąć membran wyciągnąć 8-dołkowy wkład trzymając go za końce lub używając sterylnej pęsety.
1. Dodaj 60 ml zawiesiny komórek do wnętrza wkładu umieszczonego w płytce MicroWell, umieszczając końcówkę pipety w pobliże powierzchni membrany starając się jej nie dotknąć. Dodaj powoli zawiesinę komórek tak aby nie wprowadzić żadnych pęcherzyków powietrza.
1. Umieść 8 dołkowy wkład w odpowiednią kolumnę płytki MicroWell uważając aby nie uwięzić pod membraną pęcherzyków powietrza. To można osiągnąć przez powolne umieszczanie wkładu do podłoża znajdującego się w dołkach płytki pod kątem.
1. Zakryj płytkę pokrywką i kontynuuj standardową procedurę inkubacji i “karmienia” hodowli aby uzyskać wzrost komórek i ich odpowiednią warstwę.

W związku z tym, że do hodowli w płytkach MicroWell stosuje się małe objętości podłoża pojawi się pewna utrata płynu przez wyparowanie. Może być koniecznym dodanie świeżego podłoża w regularnych odstępach aby zachować poziom płynu w dołkach. Proszę uważać na nie wprowadzenie pęcherzyków powietrza w czasie tego procesu.

• Nie używaj uszkodzonych materiałów
• Nie stosuj wkładów już użytych
• Nie pozwól aby dołek MicroWell lub wkładu wysechł
• Nie używaj odczynników niekompatybilnych z materiałem wkładów
• Nie przechowuj w temperaturach powyżej 45^oC lub poniżej +4^oC.

Ostrzeżenia:

• Chroń oczy manipulując wkładami
• Zawsze stosuj się do odpowiednich praktyk laboratoryjnych (Good Laboratory Practice)
• W przypadku pęknięcia membrany obchodź się z wkładami jak ze szkłem.

Opis techniczny

Biuletyn techniczny

Produkty te wsparte są biuletynami zawierającymi szczegółowe instrukcje do następujących technik:

• opłaszczanie powierzchni
• elektrofizjologia
• immunocytochemia
• mikroskopia elektronowa
• barwienie dla mikroskopii w świetle widzialnym

Aby uzyskać kopię biuletynu/ów prosimy o kontakt.